巨噬細(xì)胞小膠質(zhì)細(xì)胞的靶點(diǎn)標(biāo)志物和氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除解決方案

中樞小膠質(zhì)細(xì)胞是遍布大腦和脊髓的一種神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的常駐巨噬細(xì)胞，約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞總數(shù)的 10%，在維持體內(nèi)平衡、應(yīng)對損傷和炎癥以及清除細(xì)胞碎片方面發(fā)揮著重要作用。小膠質(zhì)細(xì)胞功能失調(diào)與一系列神經(jīng)系統(tǒng)疾病有關(guān)，包括阿爾茨海默癥和多發(fā)性硬化癥。外周小膠質(zhì)細(xì)胞，人體外周神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)存在小膠質(zhì)細(xì)胞，打破了學(xué)界的傳統(tǒng)認(rèn)知，是全新發(fā)現(xiàn)。物種體型越大，外周神經(jīng)元胞體越大，外周神經(jīng)系統(tǒng)中的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量也就越多；反之，物種體型越小，其胞體越小，外周神經(jīng)系統(tǒng)中的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量也就越少甚至就缺失。這就是例如在小鼠和大鼠這一類體型較小的脊椎動物中就并不存在和沒有被發(fā)現(xiàn)的原因。

活化的小膠質(zhì)細(xì)胞可以充當(dāng)抗原呈遞者并分泌細(xì)胞因子來觸發(fā)后續(xù)的免疫反應(yīng)。通過高度敏感的吞噬過程延伸到多個位置，它們可以連續(xù)檢測并吞噬受損的細(xì)胞、傳染原、碎片和噬菌斑。由于它們具有監(jiān)測和清除中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多方面能力，因此這些細(xì)胞對于損傷修復(fù)反應(yīng)至關(guān)重要，并與神經(jīng)退行性疾病有關(guān)。小膠質(zhì)細(xì)胞在大腦發(fā)育過程中也是必需的，因為它們對于樹突狀修剪至關(guān)重要，而在成熟的大腦中，它們有助于維持體內(nèi)平衡環(huán)境。

小膠質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)志物包括細(xì)胞表面標(biāo)志物、細(xì)胞內(nèi)標(biāo)志物和功能性標(biāo)志物。細(xì)胞表面標(biāo)記物是小膠質(zhì)細(xì)胞外膜上的蛋白質(zhì)，在識別和描述細(xì)胞類型、活化和功能狀態(tài)以及疾病相關(guān)影響方面起著至關(guān)重要的作用。細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記物位于小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)部，用于研究特定的細(xì)胞過程、信號通路和活化狀態(tài)。功能標(biāo)記物與特定的小膠質(zhì)細(xì)胞功能有關(guān)，包括炎癥反應(yīng)、神經(jīng)保護(hù)、組織修復(fù)和疾病相關(guān)變化。小膠質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)記物是研究、診斷和針對神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的小膠質(zhì)細(xì)胞活動進(jìn)行潛在治療干預(yù)的重要工具。通常通過觀察細(xì)胞特異性胞內(nèi)蛋白的表達(dá)來確定小膠質(zhì)細(xì)胞，如 Iba1/AIF-1、CD11b 和 TMEM119。F4/80就不用介紹了，巨噬細(xì)胞的基礎(chǔ)核心前置標(biāo)志物。其是一種位于巨噬細(xì)胞和靜息小膠質(zhì)細(xì)胞表面的糖蛋白，分子量為 160 KDa。

IBA1/AIF-1 ：離子鈣結(jié)合銜接分子 1 (Iba1) 是小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞特異性的鈣結(jié)合蛋白，參與激活的小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞膜皺褶形成和吞噬作用。是一種進(jìn)化上保守的鈣結(jié)合蛋白。作為 F-肌動蛋白結(jié)合蛋白，Iba1/AIF-1 可能會重塑小膠質(zhì)細(xì)胞的肌動蛋白細(xì)胞骨架。Iba1/AIF-1 在單核細(xì)胞譜系的細(xì)胞中專一表達(dá)，因此，靶向該蛋白的抗體被廣泛用于標(biāo)記大腦和其他組織中的小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞。

TMEM119： 是功能未知的跨膜蛋白，幾乎在所有小膠質(zhì)細(xì)胞中均特異性表達(dá)。巨噬細(xì)胞或其他免疫細(xì)胞類型不表達(dá)這種受發(fā)育調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)。檢測 TMEM119 的抗體充當(dāng)特定的細(xì)胞表面標(biāo)志物，以可視化小膠質(zhì)細(xì)胞。該標(biāo)志物同時也是鼠源和人源小膠質(zhì)細(xì)胞的特異性標(biāo)記物。TMEM119 的特點(diǎn)是其不在巨噬細(xì)胞或其他免疫/神經(jīng)細(xì)胞上表達(dá)，這一點(diǎn)不同于其他小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物。

CX3CR1：是一種趨化因子受體，存在于CNS中小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的表面，可被神經(jīng)元分泌的CX3CL1（趨化因子）激活。CX3CR1是分形趨化因子（Fractalkine）CX3CL1的受體，屬于G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）家族。在外周組織中，它主要在巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等的表面表達(dá)，參與細(xì)胞存活、增殖、細(xì)胞間粘附、遷移等。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，CX3CR1主要在小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中表達(dá)，并被用作這些細(xì)胞的標(biāo)志物。據(jù)報道，CX3CR1參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和穩(wěn)態(tài)。特別是，在CX3CR1缺陷小鼠中，小膠質(zhì)細(xì)胞對突觸的修剪不充分，導(dǎo)致神經(jīng)元之間的突觸傳遞異常，表明CX3CR1在突觸修剪中起著重要作用。

ASC/TMS1： 是由人的 PYCARD 基因編碼的銜接蛋白，通常在單核細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的胞核中表達(dá)。這種促凋亡蛋白是炎性體的關(guān)鍵介質(zhì)，其響應(yīng)于病原體感染或組織損傷而被觸發(fā)。在此過程中，它重新定位到核周空間，細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)質(zhì)以及線粒體，在此處它與 Bax 相互作用以觸發(fā)細(xì)胞色素 c 釋放并引起隨后的細(xì)胞凋亡。ASC/TMS1 也是炎癥信號的關(guān)鍵組成部分，因為它響應(yīng)促炎信號激活 caspase-1。

HS1： 是一種蛋白激酶底物，富含造血細(xì)胞。在腦中，HS1 在小膠質(zhì)細(xì)胞和單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞中表達(dá)。HS1 抗體是突出小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞胞漿的有用工具。

CD11b：跨膜蛋白、分化分子簇 11b（CD11b）/整聯(lián)蛋白 αM（ITGAM）由先天免疫系統(tǒng)細(xì)胞中表達(dá)的 α 和 β 異二聚體組成。檢測 CD11b/ITGAM 的抗體通常用于鑒定髓系譜系的細(xì)胞，包括嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞。靜息小膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)記物為 CD11bhi 和CD45low。

CD68： 是一種溶酶體蛋白，在巨噬細(xì)胞和活化的小膠質(zhì)細(xì)胞表面表達(dá)水平較高，而在靜息小膠質(zhì)細(xì)胞表面低表達(dá)水平低。

氯膦酸鹽脂質(zhì)體體內(nèi)清除小膠質(zhì)細(xì)胞，是研究其功能簡單有效的方法。當(dāng)我們在使用荷蘭Liposoma小膠質(zhì)巨噬細(xì)胞清除劑ClodronateLiposomes時，為了檢測清除效果，無論免疫熒光和流式檢測，可以根據(jù)小膠質(zhì)細(xì)胞的狀態(tài)，樣品特性選擇以上標(biāo)志物。